中国畜禽种业 ›› 2022, Vol. 18 ›› Issue (2): 41-44.

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非洲猪瘟基因缺失株和非缺失株荧光定量PCR检测方法的建立

雷宇平, 图门巴雅尔, 张仲萍, 孙杰, 宁艳, 王锦, 张昱, 胡明明, 王治维, 赵凯, 王仲兵*   

  1. 山西省动物疫病预防控制中心 030027
  • 出版日期:2022-02-26 发布日期:2022-03-15
  • 通讯作者: *王仲兵。
  • 作者简介:雷宇平(1972.10-),女,汉族,山西省太原市人,学士,正高级兽医师,研究方向:动物疫病防控。
  • 基金资助:
    山西省重点研发计划项目《山西省非洲猪瘟防控技术研究》(201903D221002)

  • Online:2022-02-26 Published:2022-03-15

摘要: 为建立一种快速检测鉴别非洲猪瘟病毒(ASFV)基因缺失株和非缺失株的荧光PCR鉴别方法,通过查询Genbank数据库中收录的相关基因组序列,应用相关软件设计针对ASFV不同毒株序列的引特异性物,用荧光PCR技术检测ASFV的不同病毒毒株,并对该方法进行敏感性、精密性和特异性试验。结果显示,该方法能在最低1.3×103copies/ml检出ASFV P27基因质粒、ASFV CD2v基因缺失质粒和ASFV MGF360-505R基因缺失质粒3种毒株的核酸片段;使用该技术重复检测10次,3种毒株的检测CV均<1%,提示有较好的稳定性。利用国家标准品非洲猪瘟病毒B646L基因质粒和无菌无核酶水分别做阳性和阴性对照,测得该技术灵敏度为100%(10/10)、特异度为100%(20/20)。本研究建立的PCR技术能快速准确鉴定ASFV的不同毒株,为防控疫情提供流行病学依据。

关键词: 非洲猪瘟病毒, ASFV, 荧光PCR

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