摘要： 文章旨在开发一种适用于组装维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)胶体金快速检测试纸条的胶体金标记抗体。试验采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,按柠檬酸三钠加入体积（75、100、150、200μL）分为1~4组,作为试验组,另设空白对照组。5支试管混合液分别水浴加热后肉眼观察胶体金颜色,计算胶体金粒径,进行抗体标记浓度筛选和pH优化。结果显示,组别3胶体金的颜色呈酒红色,最大吸收波长为524nm,胶体金粒径为22.10nm,符合胶体金最佳标准。当兔抗-Lam B抗体的加入浓度为7μg/μL,pH为8.5时具有最大吸光度为0.6439。可见,该研究胶体金标记兔抗-维氏气单胞菌Lam B多克隆抗体制备中柠檬酸三钠与氯化金四水合物的最佳比例为150μL:10mL,兔抗-Lam B多克隆抗体的最佳浓度为7μg/μL,反应体系最佳pH为8.5。
| [1] Hickman-Brenner F W, Macdonald K L, Steigerwalt A G, et al. Aeromonas veronii, a new ornithine decarboxylase-positive species that may cause diarrhea[J].J Clin Microbiol,1987,25(5):900-906. [2] Parte A C.LPSN-List of Prokaryotic names with Standing in Nomenclature (bacterio.net), 20 years on[J].Int J Syst Evol Microbiol,2018,68(6):1825-1829. [3] 田浪,温贵兰,张升波,等.斑点叉尾鮰源致病性维氏气单胞菌的分离与生物学特性鉴定[J].中国畜牧兽医,2018,45(11):3203-3210. [4] 康元环,陈亨利,张冬星,等.维氏气单胞菌TH0426株外膜蛋白lamB基因的原核表达及其免疫原性分析[J].中国兽医学报,2017,37(12):2333-2338,2343. [5] Zhang H P, Kang Y H, Kong L C, et al.Functional analysis of hisJ in Aeromonas veronii reveals a key role in virulence[J].Ann N Y Acad Sci,2020,1465(1):146-160. [6] Yang B, Zhang D, Wu T, et al.Maltoporin (LamB protein) contributes to the virulence and adhesion of Aeromonas veronii TH0426[J].J Fish Dis,2019,42(3):379-389. [7] 刘珊娜,葛怀娜,孟繁桐,等.李斯特菌免疫检测用胶体金的制备及抗体标记[J].食品科技,2016,41(1):321-324. [8] 曹涤非,薛佳莹,崔向红,等.柠檬酸三钠法制备胶体金及其应用[J].化学工程师,2019,33(12):12-14,24. [9] 彭剑淳,刘晓达,丁晓萍,等.可见光光谱法评价胶体金粒径及分布[J].军事医学科学院院刊,2000(3):211-212,237. [10] 刘颖沙,李建科,张琳,等.胶体金制备技术的改进与优化[J].食品与发酵工业,2015,41(11):110-114. [11] 梁敬博,贺昕,熊晓东,等.pH值对胶体金制备的影响[J].稀有金属,2005(4):468-470. |
| No related articles found! |
|
||
