中国畜禽种业 ›› 2021, Vol. 17 ›› Issue (12): 45-48.

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GZAS20200701分离毒株gp85基因克隆与序列分析

马燕1,2, 温贵兰1,2,*, 陈广1,2, 张喜懿1,2, 张小波1,2, 巩雪竹1,2, 韦秒粘1,2, 王兴明1,2   

  1. 1,贵州大学动物科学学院 550025;
    2,贵州省动物疫病预防控制中心 550025
  • 出版日期:2021-12-26 发布日期:2022-02-21
  • 通讯作者: *
  • 作者简介:马燕(1998.8-),女,贵州省兴义市人,大学本科,学生,研究方向:兽医微生物与免疫学。
  • 基金资助:
    2020年贵州大学“大学生创新创业训练计划“项目,贵大国创字2020(048); 2021年度贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑〔2021〕一般164); 2019年度贵州省农业科技支撑计划项目(黔科合支撑〔2019〕2286); 贵州大学2020年省级教学内容和课程体系改革项目,线上线下混合式教学《兽医免疫学》课程建设,GZJG20200035

  • Online:2021-12-26 Published:2022-02-21

摘要: 为了解贵州高脚鸡源的禽白血病病毒的gp85基因变异情况,试验采用ALV p27抗原ELISA试剂盒对贵州省高脚鸡的26份血样进行检测;并采用RT-PCR方法对其中一份血样进行ALV-A/B/J亚型鉴定,然后用gp85基因引物进行RT-PCR扩增、克隆及测序分析。结果表明,26份高脚鸡血样ALV p27抗原ELISA检测阳性率为0(0/26);ALV-A/B/J引物RT-PCR扩增的条带为422 bp,与ALV-J目的大小相符;以ALV-J阳性样品为模板,用ALV-J-gp85引物扩增出大小为931 bp左右的产物,命名为GZAS20200701。经克隆测序后与ALV参考株进行比对分析,同源性分析中GZAS20200701与ALV-J亚型中的LYJ195株同源性最高,达99.5%,与ALV-B亚型中的GD08株同源性最低,为48.5%,与A、B、C、D、E、K亚型的同源性为48.5%~50.8%。系统进化树中GZAS20200701与ALV-J中的LYJ15株属于同一个分支,亲缘关系最近,说明GZAS20200701属于ALV-J。试验为贵州高脚鸡ALV-J-gp85基因的遗传变异情况提供数据,丰富了贵州地方品种鸡ALV-J-gp85的资料。

关键词: 贵州高脚鸡, J亚型禽白血病病毒, gp85基因, 序列分析

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